Gel elektroforeza je jedna od glavnih metoda koje se koriste u molekularnoj biologiji za analizu DNK.Ova metoda uključuje migraciju fragmenata DNK kroz gel, gdje se odvajaju na osnovu veličine ili oblika.Međutim, da li ste ikada naišli na greške tokom eksperimenata s elektroforezom, kao što su razmazane trake na agaroznom gelu ili bez traka na gelu?Šta bi mogao biti uzrok ovih grešaka?
Naši tehničari su ovdje saželi nekoliko načina za rješavanje problema za vašu referencu.
1. Namazane trake na agaroznom gelu
●DNK je degradiran.Izbjegavajte kontaminaciju nukleazama.
● Pufer za elektroforezu nije svjež.Nakon višestruke upotrebe pufera za elektroforezu, ionska snaga se smanjuje, a pH vrijednost mu se povećava, pa kapacitet pufera slabi, što utiče na efekat elektroforeze.Preporučuje se česta zamjena pufera za elektroforezu.
● Korišteni su neodgovarajući uslovi elektroforeze.Ne dozvolite da napon pređe 20 V/cm i održavajte temperaturu <30°C tokom elektroforeze.Za elektroforezu ogromnog DNK lanca, temperatura bi trebala biti <15° C. Provjerite ima li pufer za elektroforezu dovoljan kapacitet pufera.
● Previše DNK je nabačeno na gel.Smanjite količinu DNK.
● Previše soli u DNK.Koristite precipitaciju etanolom za uklanjanje viška soli u naprednim fazama.
● DNK je kontaminirana proteinom.Koristite ekstrakcije fenola za uklanjanje proteina u naprednim fazama.
● DNK je denaturiran.Nemojte zagrijavati prije elektroforeze.Razrijediti DNK u puferu sa 20 mM NaCl.
2. Anomalije Migracija DNK traka
● Renaturacija COS mjesta fragmenta λHind III.Zagrijte DNK 5 minuta na 65°C prije elektroforeze, a zatim je ohladite na jedinici leda 5 minuta.
● Korišteni su neodgovarajući uslovi elektroforeze.Ne dozvolite da napon pređe 20 V/cm i održavajte temperaturu <30°C tokom elektroforeze.Provjerite ima li pufer za elektroforezu dovoljan kapacitet pufera.
● DNK je denaturiran.Nemojte zagrijavati prije elektroforeze.Razrijediti DNK u puferu sa 20 mM NaCl.
3. Blijede ili nikakve DNK trake na agaroznom gelu
● Nije bilo dovoljne količine ili koncentracije DNK napunjene na gel.Povećajte količinu DNK.Elektroforeza u poliakrilamidnom gelu je nešto osjetljivija od elektroforeze agaroze, a opterećenje uzorkom se može na odgovarajući način smanjiti.
● DNK je degradiran.Izbjegavajte kontaminaciju nukleazama.
● DNK je podvrgnut elektroforezi sa gela.Elektroforezujte gel za kraće vrijeme, koristite niži napon ili koristite veći postotak gela.
● Za vizualizaciju DNK obojene etidijum bromidom korišćen je neodgovarajući izvor svetlosti W.Koristite kratkotalasnu (254 nm) W svjetlo za veću osjetljivost.
4. Nedostaju DNK trake
●DNK male veličine je elektroforezan sa gela.Elektroforezujte gel za kraće vrijeme, koristite niži napon ili koristite veći postotak gela.
● Teško je razlikovati DNK trake sličnih molekula.Povećajte vrijeme elektroforeze i provjerite koncentracijugela kako biste bili sigurni da će postotak gela biti iskorišćen.
● DNK je denaturiran.Nemojte zagrijavati prije elektroforeze.Razrijediti DNK u puferu sa 20 mM NaCl.
● DNK lanci su ogromni, a konvencionalna gel elektroforeza nije prikladna.Analiza na pulsnoj gel elektroforezi.Koje druge probleme ste imali sa elektroforezom u agaroznom gelu?Istražit ćemo više za vodiče u budućnosti.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) je specijalizirana kompanija koja se fokusira na proizvode povezane s elektroforezom u Kini.Njegova priča počinje 1970. godine kada Kina još nije ušla u reformu i vrijeme otvaranja.Kroz višegodišnji razvoj, Liuyi Bitotech ima svoj brend, koji je na domaćem tržištu za proizvode za elektroforezu poznat kao Liuyi Brand.
Liuyi brend ima više od 50-godišnju istoriju u Kini i kompanija može da obezbedi stabilne i visokokvalitetne proizvode širom sveta.Kroz godine razvoja, dostojan je vašeg izbora!
Horizontalne ćelije za elektroforezu (rezervoari/komori) kompanije Liuyi Biotech su visokog kvaliteta i dobrog izgleda.S različitim veličinama posuda za gel, mogu zadovoljiti vaše različite eksperimentalne zahtjeve.Imamo vlastiti tehnički tim i tvornicu.Od dizajna do proizvodnje, sirovina do ključnih dijelova, možemo kontrolirati cijeli proces.DYCP 31 serija je za DNK elektroforezu, koja je modelDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, iDYCP-31E.Razlike među njima su veličina gela i cijena.Pružamo pune veličine proizvoda za naše kupce.ModelDYCP-32Cmože napraviti najveći gel 250mm*250mm.
U međuvremenu, preporučujemo naše napajanje za elektroforezuDYY-6C,DYY-6DiDYY-10Cza naše ćelije za elektroforezu (rezervoari/komori) serije DYCP-31 i 32.
Ako želite više informacija o proizvodima, posjetite ovu web stranicu da biste dobili više, i dobrodošli da nas kontaktirate putem e-pošte kako biste nas obavijestili što želite i vidjeli možemo li ponuditi rješenja za vas.
Za više informacija o nama, kontaktirajte nas putem e-pošte[email protected], [email protected].
Vrijeme objave: 09.05.2022