Priprema agaroznog gela za elektroforezu

Priprema agaroznog gela za elektroforezu

Napomena: Uvek nosite rukavice za jednokratnu upotrebu!

Korak po korak uputstva

Vaganje agaroznog praha:upogledajte papir za vaganje i elektronsku vagu za mjerenje 0,3 g agaroznog praha (na bazi sistema od 30 ml).

Priprema TBST pufera:ppripremite 30 ml 1x TBST pufera u Erlenmajerovu tikvicu od 100 ml.

Otapanje agaroze u prahu:pprah agaroze ubacite u TBST pufer i dobro protresite.Stavi ih unutrau mikrovalnu pećnicu i zagrijavajte (obično 50 sekundi, prekriveno aluminijskom folijom) dok se potpuno ne otopi.

Hlađenje i dodavanje nukleaze:uu rukavicama izvadite smjesu iz mikrovalne i ostavite da se malo ohladi u hladnoj vodi dok se ne zagrije (otprilike 60°C). Dodajte 2 µl nukleaze (Eb zamjena) uz mućkanje da se dobro promiješa.

Priprema gel kalupa:

• Coslonite i osušiteposuda za gel i uređaj za livenje gelarezervoara za elektroforezu.
•  Pvezati gelposlužavniku unutrašnji rezervoar i umetnite češalj u fiksni položaj.
• Pomiješajte rastvor agaroznog gela, ohlađen na oko 65°C, i pažljivo ga izlijte naposuda za geluuređaj za livenje gela, razmazujući ga polako dok ne formira ravnomjeran sloj gela na staklenoj ploči.
• Ostavite da odstoji na sobnoj temperaturi dok se gel potpuno ne stvrdne.
• Nežno uklonite češalj okomito i uklonite traku.
• Stavite gelposlužavniku rezervoar za elektroforezu.

Važno: Osigurajte da nema mjehurića zraka u području zubaca češlja. Površina tečnosti treba da bude glatka bez mreškanja.

Pokretanje gela

Punjenje gela

Nakon što se gel stvrdne, stavite ga u rezervoar za elektroforezu i sipajte pufer za elektroforezu dok se gel ne potopi.

Priprema uzoraka

• Uzmite marker i pufer za punjenje iz frižidera.
• Uzorcima dodajte 6 µl pufera za punjenje i dobro promiješajte.
• Koristeći mikropipetu, polako ubacite uzorke u velike jažice gela (pazite da ne probušite gel i nemojte dozirati cijelu zapreminu kako biste izbjegli mjehuriće zraka).
• Stavite marker u bilo koji od malih bunara (zapamtite njegov položaj).

Pokretanje elektroforeze

• Pokrijte rezervoar za elektroforezu i započnite elektroforezu odmah nakon punjenja gela.
• Postavite napon na 60-100V. Uzorci će migrirati s negativne elektrode (crna) na pozitivnu elektrodu (crvena).
• Viši napon skraćuje efektivni opseg razdvajanja agaroznog gela.
• Zaustavite elektroforezu kada bromofenol plava boja dostigne oko 1 cm od donjeg ruba gel ploče.

Posmatranje rezultata

Nakon odvajanja traka, zaustavite elektroforezu, izvadite gel i direktno ga detektujte i fotografišite.

Koristite sistem za snimanje u gelu da fotografišete i posmatrate trake (proverite da li postoje trake za marker ili uzorke).

Nakon što dobijete mapu gel trake, pronađite marker. Na osnovu markera možete odrediti ciljne trake!

Peking Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) proizvodi proizvode za elektroforezu više od 50 godina. Ovdje predstavljamo naše sisteme za horizontalnu elektroforezuagarozni gelelektroforeza.Izaberisistemi za horizontalnu elektroforezuiz Pekinga liuyi za vaš eksperiment gel elektroforeze koji će vam pomoći u istraživanju u biotehnološkoj industriji.

Nudimo različite modele horizontalnih rezervoara za elektroforezu za lijevanje i trčanje malihagarozagelovi do velikihagarozagelovi

Vodič za odabir jedinice za horizontalnu uronjenu gel elektroforezu

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) specijalizirao se za proizvodnju instrumenata za elektroforezu više od 50 godina s vlastitim profesionalnim tehničkim timom i R&D centrom. Imamo pouzdanu i kompletnu proizvodnu liniju od dizajna do inspekcije, skladište, kao i marketinšku podršku. Naši glavni proizvodi su ćelija za elektroforezu (rezervoar/komora), napajanje za elektroforezu, plavi LED transiluminator, UV transiluminator, sistem za gel slike i analizu itd. Takođe isporučujemo laboratorijske instrumente kao što su PCR instrument, vorteks mikser i centrifuga za laboratoriju.

Ako imate plan kupovine za naše proizvode, slobodno nas kontaktirajte. Možete nam poslati poruku na email[email protected]ili[email protected], ili nas pozovite na +86 15810650221 ili dodajte Whatsapp +86 15810650221, ili Wechat: 15810650221.

Skenirajte QR kod za dodavanje na Whatsapp ili WeChat.